Protocolli e raccomandazioni di devitrificazione degli ovuli

Si tratta di una tecnica veloce, ottimizzata e semplice. Il successo della procedura sta nel monitoraggio rigoroso del protocollo, specialmente in quei punti critici per la sopravvivenza degli ovociti.
Nel protocollo di devitrificazione di KITAZATO THAWING MEDIA VT 802 (ref.91182) -OPEN SYSTEM, troverete l'intera procedura descritta in modo esaustivo, passo dopo passo.

Scarica il protocollo di devitrificazione

Per ottimizzare il processo e ottenere migliori risultati di scongelamento, il team di embriologi di OXX Bank mette a disposizione indicazioni e suggerimenti per superare con successo i diversi punti critici della tecnica.

  • Il cryotop deve essere SEMPRE immerso in azoto liquido. Prestare attenzione con il passaggio del serbatoio al rack di raffreddamento, e durante il ritiro del tappo della cannuccia cryotop.
  • Scaldare separatamente, il tubo di mezzo TS e la piastra nell'incubatrice > 2 ore (preferibilmente durante la notte).
  • Stemperare DS e WS a 25-27°C (temperatura ambiente) per 1 ora.
  • È molto importante che lo shock termico per TS si verifichi a 37°C (mai meno!). È essenziale eseguire il controllo della temperatura del fluido per garantire la temperatura ottimale al momento dell'immersione del cryotop in TS.

Attenzione:

  • La temperatura diminuisce rapidamente quando si solleva il coperchio della capsula di Petri. Prendilo in considerazione al momento del controllo della temperatura (37°C deve essere la temperatura reale del centro della piastra al di fuori dell'incubatrice e una volta sollevato il coperchio). Sollevarlo nello stesso momento in cui si immerge la cannuccia.
  • Immersione rapida e immediata del cryotop in TS (37°C), in < 1 secondo. A causa del basso volume del liquido di carica del cryotop, se il tempo è maggiore a 1 secondo, la velocità di riscaldamento non è abbastanza elevata per una sopravvivenza adeguata.
  • Durante il primo minuto in TS l'ovocita dovrebbe staccarsi da solo dalla cannuccia del cryotop. Dopo 1 minuto abbiamo diverse strategie per ottenerlo (in questo ordine):
    1. Strofinare il cryotop contro il fondo della capsula di Petri (sul lato dove non c'è l'ovocita) fino a quando l'ovocita non si stacca dalla cannuccia.
    2. Versare il liquido sopra l'ovocita con una pipetta (stripper), ma senza farlo toccare con la punta del capillare.
    3. Con il capillare, tirare delicatamente il lato della lama del cryotop facendola vibrare in modo che rilasci l'ovocita.
  • Gli ovociti sono estremamente sensibili durante il processo e quindi:
    • Manipolarli il minimo indispensabile, e sempre con grande cura.
    • Utilizzare capillari di diametro sufficiente per minimizzare il potenziale danno all'ovocita (maggiore di 170μm)
  • Incubare gli ovociti a 37°C per 2 ore prima dell'ICSI.

Preparazione e realizzazione

Consigli e accorgimenti

Informazioni di interesse

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